技术贴士|3D细胞培养与监测解决方案


发布时间:

2021-12-01

3D细胞培养与监测是生物学研究的新趋势。2D培养试验中,细胞由于无法实现类似于体内的结构组织和连接,使得细胞形态与活力、增殖与分化、基因和蛋白表达、对刺激的反应和代谢及一般的细胞功能受到了限制或减弱,基于3D培养建立起来的生理细胞—细胞,细胞—细胞外基质相互作用可以模拟天然组织的特异性,构成了一个细胞—细胞,细胞—细胞外基质间的相互作用的3D通讯网络,相比于传统2D培养,3D培养生理相关性更强,这在干细胞培养和分化、癌生物学、药物和毒性筛选及组织工程中优势尤为突出。

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●  丰富的传统2D培养经验。                                                                 ●  更好地模拟体内正常细胞生长环境。

●  细胞生长方式、基因表达与体内状态差异较大。                                ●  反映分化等细胞活动和细胞间反应。

●  细胞间、细胞与基质间相互作用及体内存在明显差异。                       ●  更好地预测病程和药物反应。

●  在化合物筛选、疾病机理研究中提供非预测性的结果。                        ●  更准确建立靶组织模型。

一、BioTek关于3D细胞研究的解决方案:实现无人值守

二、CBM活细胞智能成像系统:为3D细胞培养检测而生

①、细胞培养与换液

BioSpa8是一款自动化孵育器,可实现CytationTM和MultiFlo FX联用,同时实时监测温度,CO2/02和湿度,确保细胞培养的各个阶段均处于理想的理化环境,最大程度实现自动化,降低人为干扰。         

✔8位细胞培养;

✔最高45℃温度控制;

✔湿度控制;

✔CO2/02控制;                                         

MultiFlo FX是一款模块化与自动化的多功能分液系统,兼容6-1536孔板,采用的平行分液技术,能够满足用户多任务,多功能操作的需求,大大节省实验空间和操作时间。

✔4种试剂平行分液;

✔清洗与分液;

✔培养基更换;

✔随机分液;                  

②、成像监测与分析

Cytation活细胞智能成像系统具备灵活的全自动成像能力,强大的图像处理及高内涵分析功能。多种成像模式及方法可满足用户对3D细胞成像的多种需求,具有广泛的应用性与强大的便捷性。

✔明场、荧光场、相差、彩色明场;

✔3D活细胞动态成像,支持低氧实验;

✔自动进样器、快速加样成像;

✔4-Zone温控,最高65℃。            

 

  Gen5软件具有高内涵图像分析

授权。既可以执行成像捕获指令,

又可以对捕获到的批量图片进行

数据分析并输出细胞水平的各项

参数,包括细胞大小、荧光信号

等。从绚丽的图片拍摄到定量的

细胞大数据Gen5一站搞的定。                  

 

③、3D细胞的应用

药物筛选、细胞活力、蛋白表达/激酶检测、细胞毒性、肿瘤迁移、细胞侵袭、免疫治疗、精准治疗、细胞分化、干细胞培养、类器官成像、模式生物、微生物成像等

参考文献:

1.Evans DM, Fang J, Silvers T, Delosh R, Laudeman J, Ogle C, Reinhart R, Selby M, Bowles L, Connelly J, Harris E, Krushkal J, Rubinstein L, Doroshow JH, Teicher BA. Exposure time versus cytotoxicity for anticancer agents. Cancer Chemother Pharmacol. 2019 Aug;84(2):359-371. 

2.Ju JA, Godet I, DiGiacomo JW, Gilkes DM. RhoB is regulated by hypoxia and modulates metastasis in breast cancer. Cancer Rep (Hoboken). 2020 Feb;3(1):e1164.

3.Obinu A, Rassu G, Corona P, Maestri M, Riva F, Miele D, Giunchedi P, Gavini E. Poly (ethyl 2-cyanoacrylate) nanoparticles (PECA-NPs) as possible agents in tumor treatment. Colloids Surf B Biointerfaces. 2019 May 1;177:520-528.

4.Dong G, Wang S, Ge Y, Deng Q, Cao Q, Wang Q, Shang Z, OuYang W, Li J, Liu C, Tang J, Zhao W, Gu Y. Serum-Free Culture System for Spontaneous Human Mesenchymal Stem Cell Spheroid Formation. Stem Cells Int. 2019 Oct 15;2019:6041816.

5.Bell JB, Rink JS, Eckerdt F, Clymer J, Goldman S, Thaxton CS, Platanias LC. HDL nanoparticles targeting sonic hedgehog subtype medulloblastoma. Sci Rep. 2018 Jan 19;8(1):1211.

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